domingo, 22 de enero de 2023

ADN RECOMBINANTE: MULAS FÉRTILES E INSULINA A PARTIR DE BROCOLI

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

La mula, el híbrido estéril producto de la unión del material genético de un asno y una yegua posee características de ambas especies. La particularidad es que hay registros de hembras fértiles. Cuando los cromosomas se recombinan, todos aquellos óvulos generados con parte de los genes de yegua y asno son óvulos estériles, debido a que no hay correspondencia en la localización de los cromosomas que determinan alguna característica. Sin embargo, los escasos óvulos que por recombinación al azar se formen solamente con el ADN heredado de su madre o de su padre asno, pueden ser fecundados. 

ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL

(Para Tratamiento de Diabetes)

  • Tema: Clonación del cDNA del gen de la insulina humana en raíces aéreas de Brassica oleracea var italica (brócoli).
  • Objetivo: Exponer los resultados sobre el establecimiento de cultivos de raíces transformadas de Brassica oleracea var italica (Brocoli) para la producción de insulina humana con el objetivo de coadyuvar a la creciente demanda de esta proteína debida al aumento de la población que presenta problemas de diabetes. 
  • Gen o secuencia a clonar: Gen de la insulina humana (Ins)
  • Enzimas de restricción: EcoR I y Xho I
  • Enzima ligasa: T4 DNA ligasa
  • Vector: pCAMBIA 1105.1 
  • Célula receptora: Eucarionte: Célula de Brassica oleracea var italica.
  • Mecanismo de transferencia o inserción del gen: Transfección del cDNA a plántulas de Brócoli de 3 a 4 semanas de germinación mediante punción, la cual desencadena las señales químicas entre planta-agrobacterium promoviendo la transfección del DNA del plásmido bacteriano al genoma de la planta. 
  • Métodos de identificación de clones: Se utilizó la amplificación por PCR de los fragmentos de preproinsulina y proinsulina con los oligos correspondientes a partir del DNA genómico del tejido vegetal. (Este se extrajo del tejido mediante la técnica reportada por Rouhibakhsh, y se utilizó como templado para la PCR utilizando un termociclador TECHNE con el kit PlatinumR Super Mix High Fidelity).


Bibliografía:

1. Yusuf S. Why can’t mules have babies? [Internet]. Science ABC. 2020 [citado el 22 de enero de 2023]. Disponible en: https://www.scienceabc.com/nature/animals/why-cant-mules-have-babies.html

2. García Reyes B, Montes Horcasitas M del C, Ramírez E, Castolo AA, Vargas J, Gúzman O, et al. Clonación del cDNA del gen de la insulina humana en raíces aéreas de Brassica oleracea var italica (brócoli). 2015 [citado el 22 de enero de 2023]; Disponible en: https://www.semanticscholar.org/paper/055c0153f1004ffb0b7c0efc2979516a0e5a972a

En caso de no funcionar el enlace, se adjunta otra versión del mismo artículo de investigación: García Reyes B, Montes Horcasitas M del C, Ramos Ramírez EG, Ariza Castolo A, Pérez Vargas J, Gómez Guzmán O, et al. Clonación del cDNA del gen de la insulina humana en raíces aéreas de Brassica oleracea var italica (brócoli). CENIC [Internet]. [citado el 22 de enero de 2023]; Disponible en: https://www.redalyc.org/pdf/1812/181220509063.pdf

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